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吖啶酯(NSP-SA-NHS)蛋白標(biāo)記的發(fā)光染料配置說明

 
 
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更新 2021-06-28 13:37
 

武漢德晟生化科技有限公司

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詳細(xì)說明

吖啶酯(NSP-SA-NHS)Cas199293-83-9及其相關(guān)化合物已被證明是非常有優(yōu)勢(shì)的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物,其穩(wěn)定性、活性和敏感性超過了某些放射性同位素。吖啶酯能與含有一級(jí)氨基的蛋白發(fā)生反應(yīng)。在堿性條件下,NHS作為離去基團(tuán)被取代,蛋白質(zhì)與吖啶酯形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)完成后,多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。

在存在堿性過氧化氫時(shí),吖啶標(biāo)記的蛋白不需要酶催化可自行發(fā)光。具體發(fā)光原理是在堿性過氧化氫溶液中,吖啶酯受到過氧化氫離子的進(jìn)攻,生成一個(gè)有張力的不穩(wěn)定的二氧乙烷,進(jìn)一步分解成CO2和電子激發(fā)態(tài)的吖啶酮,當(dāng)吖啶酮回到基態(tài)時(shí)發(fā)出最大吸收波長(zhǎng)430nm的光子。

這個(gè)發(fā)光過程是十分短暫(整個(gè)過程的發(fā)生小于2秒),觸發(fā)方案必須增加內(nèi)部光度計(jì)和光子探測(cè)器;另外,也可以使用配備自動(dòng)進(jìn)樣器的多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行發(fā)光數(shù)據(jù)采集。蛋白質(zhì),多肽,抗體,核酸都可以用本產(chǎn)品進(jìn)行標(biāo)記。吖啶酯在堿性過氧化氫的激發(fā)下快速發(fā)光,因此通過收集光子可以檢測(cè)到標(biāo)記化合物。

主要用于:化學(xué)發(fā)光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測(cè)等研究。

儲(chǔ)存條件: 20℃,避光

運(yùn)輸條件:  2-8℃,避光

1.配制說明

標(biāo)記緩沖液:0.2M NaHCO3  (pH=9.0)

標(biāo)記終止緩沖液: 10% 賴氨酸  0.2M NaHCO3  (pH=9.0)溶液;

脫鹽純化緩沖液:0.1M Na2HPO4-NaH2PO4  (pH=6.5)

吖啶酯發(fā)光液:(0.01~0.1M) NaOH+0.05% H2O2

2. 計(jì)算標(biāo)記所用抗體(蛋白質(zhì))和吖啶酯的量:

通常設(shè)定摩爾比n(抗體): n(吖啶酯)=1:10~1:50,具體需根據(jù)氨基酸組分進(jìn)行摸索調(diào)整;

配制2.5mg/ml 吖啶酯-DMSO母液,注意玻璃器皿盛放并避光;

使用0.2M NaHCO3pH=9.0) 溶液配制0.1~0.5 mg/ml 抗體反應(yīng)液 。

需要注意的是,吖啶酯標(biāo)記的蛋白可以在酸性緩沖液中4℃避光存儲(chǔ)(注意補(bǔ)加疊氮鈉等防腐劑),如果儲(chǔ)存效果不佳,則請(qǐng)避光保存于-20℃或者-80℃。德晟專業(yè)生產(chǎn)化學(xué)發(fā)光試劑、化學(xué)發(fā)光底物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。我們還可以接受定制合成服務(wù),歡迎前來咨詢訂購(gòu)!

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