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在許多生物實(shí)驗(yàn)中需要用緩沖液來(lái)維持有效的PH值,緩沖液對(duì)實(shí)驗(yàn)的成敗至關(guān)重要。
選擇緩沖液時(shí)首先要考慮實(shí)驗(yàn)中的PH值與緩沖液PH值范圍一致,在考慮不同緩沖液的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是否適合你的實(shí)驗(yàn)。生物緩沖液種類很多,在本文中我們主要討論比較常用的幾種生物緩沖液的制備方法。
制備TRIS堿和TRIS-HCL緩沖液
Tris:制備 1 升 1M Tris 緩沖液,先準(zhǔn)備將121.14克Tris粉末溶解在750mL的dH20中,用濃***調(diào)節(jié)至所需的 pH 值,用 dH2O 填充至 1L 的最終體積。
Tris HCl:要制備1升 1M Tris HCl 緩沖液,先將157.60g的Tris-HCl溶解在 750mL的 dH2O 中,用 10N氫氧化鈉調(diào)節(jié)至所需 pH,用 dH2O填充至1L的最終體積。
制備HEPES緩沖液
制備 1 升 1M HEPES 緩沖溶液,先將 238.3克HEPES粉末溶解在750 mL的dH2O 中,用10N 氫氧化鈉調(diào)節(jié)至所需 pH,用dH2O填充至 1L 的最終體積,并通過(guò)過(guò)濾器或高壓滅菌器進(jìn)行消毒。將緩沖液儲(chǔ)存在 4°C。
制備PIPES緩沖液
制備1升 1M PIPES 游離酸緩沖溶液,先將302.37克PIPES游離酸加入600mL的dH2O,使用 10N 氫氧化鈉調(diào)節(jié)至所需 pH,用 dH2O填充至 1L 的最終體積。
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